DNAメチル化解析(WGBS, RRBS, EPIC)のご案内
Published on 07/09/2023 16:39
- 1839
サンプル品質が十分でない場合、解析の中断・納期の遅延などの可能性があります。
各項目をよくお読みいただき、十分に注意してサンプル調製を実施いただくようお願いいたします。
提出サンプル種別ごとの要件の概要
抽出済みゲノムDNAでご送付の場合
アプリケーション | DNA濃度 | 液量 | 総量 | 備考 |
---|---|---|---|---|
WGBS | 10 ng/µL 以上 | 20 µL以上 | 300 ng 以上 | |
RRBS | 30 ng/µL 以上 | 30 µL以上 | 1 µg 以上 | |
EPIC | 30 ng/µL 以上 | 30 µL以上 | 1 µg 以上 | サイズ 10 kb以上 |
※DNAの推奨純度はOD260/OD280 ≧ 1.8、OD260/OD230 ≧ 1.0となっております。
弊社にDNA抽出からご依頼の場合
組織
細胞
臨床検体
サンプル品質に関する注意事項
- 定量はQubitなどのDNA特異的蛍光色素を用いた方法を推奨いたします。
Nanodrop等吸光度で測定された値の場合、RNAや遊離核酸の値が測定値に含まれることでDNA濃度が高く見積もられ、品質確認(QC)やライブラリー調製に影響を与える可能性があります。 - DNA濃度が要件より低い場合はエタノール沈殿などで濃縮し、要件を満たす濃度に調整してお送りください。
- RNAの残留があると解析に影響を及ぼす場合がありますので、必ずRNase処理を実施ください。
- EPIC用サンプルは、RNase処理後、1%アガロースゲルでの電気泳動またはBioAnalyzer/Tapestationなどでの測定により、10 kbp以上の長いDNAが見られることとと、2 kbp以下のスメアが見られないことをご確認ください。 WGBSおよびRRBS用サンプルにつきましても、電気泳動またはBioAnalyzer/Tapestationでの測定によりサンプルの分解がないことと、RNAの混入がないことをご確認いただくことを推奨いたします。
- 比較するサンプルは必ず同じ方法で調製してください。
- タンパク質や有機溶媒等が混入しないようお願いいたします。
- サンプルはNuclease free waterへの溶解を推奨いたします。
EDTAが低濃度(0.1 mM以下)のTEバッファーはご使用可能です。DEPC水は推奨しておりません 。
キットバッファーの組成が不明の場合は製造元へご確認ください。 - シーケンス前にQCを行い、結果をご報告いたします。クオリティが要件を満たさない場合には、再度サンプルのご送付をお願いする場合があります。
- QC後受入基準値に満たない場合は、サンプルの再送付や再精製、RNase処理(有償)をご提案する場合があります。
- QCが3回以上になる場合は追加料金が発生することがあります。
サンプル送付に関する注意事項と送付先
その他注意事項 (必ずお読みください)
- 弊社にご委託頂く際は、こちらのリンクにある注意をよくお読みください。
お問合せ先
株式会社Rhelixa 研究支援事業本部
service-support@rhelixa.com
TEL: 03-6272-3115