核酸抽出用 ヒト由来 (臨床検体) 組織のご準備方法
Published on 07/09/2023 16:41
- 506
核酸抽出用のヒト由来 (臨床検体) 組織受け入れ要件について、以下にご案内いたします。
必ず事前にご熟読の上、サンプルのご準備をお願いいたします。
1. 組織サンプルの調製方法
組織量
10〜30 mg
※ 重量測定が難しい場合は、3 mm角以上を推奨いたします。
チューブ内のサンプルを全量用いて抽出いたします。弊社で一部を分取する等の対応はお受けできませんので、必ず上記記載の分量にてご提出をお願いいたします。
受け入れ形態
核酸安定化試薬に組織全体を浸漬し、1.5 mLチューブに入れた状態
バックアップを含め、1サンプルにつき3本ずつご準備ください。
(例) 解析したいサンプル数が4サンプル
4サンプル x 3本 = 12 本をご準備ください。
組織サンプル準備方法
- 核酸安定化試薬を1.5 mLチューブに必要量入れておく。
組織1mgあたり10 µL、詳細はお使いの核酸安定化試薬の説明書に従ってください。 - 組織塊をおよそ10 ~ 30 mg程度になるよう(3 ~ 5 mm四方程度の大きさ)に切り分け、迅速に1. で準備した1.5 mLチューブに入れる。このとき、組織全体が核酸安定化試薬に浸るように留意する。
- チューブにサンプルが付着している場合があるので、チューブ表面を70%エタノールまたは次亜塩素酸水など、適切な消毒液で拭く。
- 1.5 mLチューブを立てた状態で低温(4℃または-20℃)で一晩インキュベートした後、-80℃で凍結する。
インキュベートの温度については、お使いの核酸安定化試薬の説明書に従ってください。
核酸安定化試薬の例
核酸安定化試薬は分解しやすいRNA用のものとされていますが、DNA抽出用としてもご使用頂けます。
下記試薬についてのご不明点は各種メーカーまでお問い合わせください。
新鮮なサンプルと凍結サンプルでは使用可能な安定化試薬が異なります。
-
新鮮なサンプル用 ※すでに凍結されている組織には適しません。
- RNAlater RNA stabilization Reagent (サーモフィッシャー)
- RNAprotect Tissue Reagent (QIAGEN)
- Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution(ニッポン・ジーン)
-
凍結保存サンプル用
- RNAlater™-ICE Frozen Tissue Transition Solution (サーモフィッシャー)
凍結保存した組織中のRNAの分解を防ぎ安全に融解させる試薬です。
融解後も組織中のRNAを保護可能です。
- RNAlater™-ICE Frozen Tissue Transition Solution (サーモフィッシャー)
2. サンプルの梱包に関する注意事項
- 指定がない限り、1.5 mLチューブに分注ください。
- チューブの外側を70% エタノールあるいは塩素濃度200 ppmの次亜塩素酸ナトリウム水溶液でお拭きください。
※ マジックの種類によっては70%エタノールで消える場合がありますので、その場合はサンプル名を再度お書きくださいますようお願いいたします。
※ノロウイルスやロタウイルスが含まれる可能性のあるサンプルにつきましてはエタノール消毒が有効でないため、塩素濃度200 ppm(目安:市販の塩素系漂白剤を250倍希釈する)の次亜塩素酸ナトリウム水溶液を使用ください。 - チューブフタにサンプル名をご記入ください。
- サンプル名が見えるように、パラフィルムでシールしてください。
- 発送前にサンプルを冷凍しておいてください。
- ボックスにサンプルの入ったチューブを入れてください。
- サンプルボックスをジップ袋にお入れください。
- 貴重なサンプルは予め分取し、一部をお手元に残してください。
梱包準備が整いましたら、こちらのリンクから梱包手順と送付先をご確認ください。
3. サンプルに関する注意事項
- 特殊なサンプルにおいては料金・納期・要件が異なる場合がございます。
- 弊社ではTrizolまたはISOGEN等で溶解済みのサンプルはお受けできません。
<事前にお問い合わせが必要なサンプル>
* 感染の危険性のあるサンプル(人獣共通感染症を含む)
* 感染実験に使用したサンプル
* 一部の組織(硬い組織等)
上記のサンプルはRNA抽出ができない可能性がございます。
必ず事前にお問い合わせください。
4. その他注意事項 (必ずお読みください)
弊社にご委託頂く際は、こちらのリンクにある注意をよくお読みください。
5. お問合せ先
株式会社Rhelixa 研究支援事業本部
service-support@rhelixa.com
TEL: 03-6272-3115